A organização espacial do RNA é fundamental para processos celulares e doenças, mas suas implicações funcionais ainda são pouco compreendidas. Pesquisadores desenvolveram o CRISPR-TO, um sistema que permite o controle programável da localização de RNA endógeno em células vivas. Essa inovação possibilita a manipulação em tempo real e a identificação de RNA que impulsiona o crescimento de neuritos.
O CRISPR-TO utiliza a proteína dCas13, que não corta o RNA, para direcionar a localização de RNAs endógenos a diferentes compartimentos subcelulares, como a membrana mitocondrial externa e grânulos de estresse. O sistema permite o transporte bidirecional de RNA ao longo de microtúbulos, facilitando a observação dinâmica da localização do RNA em células vivas.
Em experimentos com neurônios corticais primários, foi demonstrado que os RNAs reposicionados sofrem tradução local ao longo dos neuritos. A localização do RNA de β-actina, por exemplo, aumenta a formação de protrusões dinâmicas e inibe a regeneração axonal. A triagem realizada com o CRISPR-TO identificou a localização do RNA Stmn2 como um fator crucial para o crescimento de neuritos.
O CRISPR-TO representa um avanço significativo na exploração do transcriptoma espacial, superando limitações de tecnologias anteriores de sequenciamento e imagem. Essa plataforma versátil promete facilitar investigações funcionais em larga escala sobre a localização do RNA em células e organismos vivos.
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